4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS:200422-18-0

Effett: ONPG huwa sottostrat użat speċifikament biex jiskopri l-preżenza u l-attività tal-enzima β-galactosidase.Meta l-enzima β-galactosidase tkun preżenti u attiva, tinqasam l-ONPG f'żewġ prodotti: o-nitrofenol u derivattiv tal-galactose.Il-liberazzjoni ta 'o-nitrofenol tirriżulta f'bidla fil-kulur isfar, li tista' titkejjel bl-użu ta 'spettrofotometru.

Applikazzjoni: L-ONPG għandu diversi applikazzjonijiet fir-riċerka tal-bijoloġija molekulari u tal-bijokimika:

Determinazzjoni tal-attività β-galactosidase: ONPG huwa komunement użat biex ikejjel u jikkwantifika l-attività tal-enzima β-galactosidase.Ir-rata ta 'formazzjoni ta' o-nitrofenol, li hija direttament proporzjonali għall-attività ta 'l-enzima, tista' titkejjel spettrofotometrikament.

Espressjoni tal-ġeni u regolamentazzjoni: ONPG spiss jintuża f'esperimenti relatati ma 'studji ta' espressjoni tal-ġeni u regolamentazzjoni.Huwa użat ta 'spiss f'assaġġi tal-proteini tal-fużjoni, bħas-sistema ta' fużjoni lacZ użata b'mod komuni, biex tistudja l-espressjoni tal-ġeni taħt il-kontroll ta 'promoturi speċifiċi.L-attività ta' beta-galactosidase mkejla bl-użu ta' ONPG tipprovdi għarfien dwar il-livell ta' espressjoni tal-ġeni.

Screening għall-attività β-galactosidase: ONPG jista 'jintuża bħala metodu ta' screening kolorimetriku fit-teknoloġija tad-DNA rikombinanti biex jidentifika l-preżenza u l-funzjonalità tal-ġene LacZ, li jikkodifika β-galactosidase.Dan il-metodu ta 'screening jgħin fl-identifikazzjoni ta' kloni li fihom il-ġene ta 'interess.

Studji tal-kinetika tal-enżimi: ONPG huwa utli wkoll fl-istudju tal-kinetika tal-enzima β-galactosidase.Billi tkejjel ir-rata ta 'reazzjoni ta' enzima-sottostrat f'konċentrazzjonijiet ta 'sottostrat differenti, huwa possibbli li jiġu ddeterminati parametri kinetiċi bħal kostanti Michaelis-Menten (Km) u rati massimi ta' reazzjoni (Vmax).